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Text File  |  1996-02-27  |  3KB  |  44 lines
  1.        Document 0625
  2.  DOCN  M9630625
  3.  TI    Analysis of trafficking of Rev and transdominant Rev proteins in living
  4.        cells using green fluorescent protein fusions: transdominant Rev blocks
  5.        the export of Rev from the nucleus to the cytoplasm.
  6.  DT    9603
  7.  AU    Stauber R; Gaitanaris GA; Pavlakis GN; Human Retrovirus Section,
  8.        NCI-FCRDC, Maryland 21702-1201, USA.
  9.  SO    Virology. 1995 Nov 10;213(2):439-49. Unique Identifier : AIDSLINE
  10.        MED/96074519
  11.  AB    Expression of gag/pol and env genes of human immunodeficiency virus
  12.        requires the viral Rev protein. Mutant Rev proteins, displaying a
  13.        transdominant phenotype (TDRev), were shown to inhibit Rev function. To
  14.        investigate the underlying mechanism of this inhibition, the green
  15.        fluorescent protein (GFP) of Aequorea victoria was fused to Rev and
  16.        TDRev, which allowed the study of their trafficking and interactions in
  17.        living human cells. Both Rev-GFP and TDRev-GFP were shown to retain
  18.        appropriate nucleolar localization and function. Upon actinomycin D
  19.        treatment, Rev-GFP was transported to the cytoplasm within 1.5 hr, while
  20.        TDRev, although partially dissociated from the nucleolus, was retained
  21.        in the nucleus. Coexpression of Rev-GFP and TDRev in the same cell
  22.        demonstrated that TDRev inhibited the transport of Rev-GFP from the
  23.        nucleus to the cytoplasm. This inhibition was specific for Rev, since
  24.        the export of the functionally analogous Rex protein of the human T-cell
  25.        leukemia virus type I was not inhibited by TDRev. These results indicate
  26.        that Rev and TDRev form heteromultimers in the nucleolus and that this
  27.        interaction prevents Rev's export from the nucleus to the cytoplasm. In
  28.        addition to providing a model for the function of TDRev, these results
  29.        also demonstrate the successful application of protein fusions to GFP to
  30.        study localization and trafficking of proteins in living mammalian
  31.        cells.
  32.  DE    Base Sequence  Biological Transport  Cell Line, Transformed  Cell
  33.        Nucleolus/METABOLISM  Cell Nucleus/*METABOLISM  Cytoplasm/*METABOLISM
  34.        Dactinomycin/PHARMACOLOGY  DNA Primers  Gene Products,
  35.        rev/GENETICS/*METABOLISM  Gene Products, rex/METABOLISM  Hela Cells
  36.        Human  HIV Core Protein p24/BIOSYNTHESIS  HIV-1/*METABOLISM  Luminescent
  37.        Proteins/GENETICS/METABOLISM  Molecular Sequence Data  Phenotype
  38.        Recombinant Fusion Proteins/METABOLISM  Support, Non-U.S. Gov't
  39.        Support, U.S. Gov't, P.H.S.  JOURNAL ARTICLE
  40.  
  41.        SOURCE: National Library of Medicine.  NOTICE: This material may be
  42.        protected by Copyright Law (Title 17, U.S.Code).
  43.  
  44.